Tris缓冲液的作用和特点

Tris缓冲液作为一种生物缓冲试剂，一直在生物化学研究中发挥着很大的作用。Tris生物缓冲液的用途非常广泛。它可在凝胶中采用Tris HCl缓冲体系以更好的稳定pH值；也能与甘氨酸构成缓冲体系在电泳缓冲液里稳定PH值；而且能作为核酸和蛋白质的溶剂。根据Tris缓冲液的低离子强度特点，对于形成线虫的中间纤维起到助力的作用。另外滴加EDTA后的Tris盐酸缓冲液能够用于DNA的稳定和存储；核酸电泳实验中一般常用到TAE缓冲液和TBE缓冲液，这是调节Tris Hcl溶液的PH值，然后替换成乙酸和硼酸获得的两种缓冲液。


Tris-HCl缓冲液：pH = 7.5 ~ 8.5;三磷酸缓冲液:pH = 5.0 ~ 9.0。

除TRIS - hcl外，TRIS还有多种衍生化缓冲液：

TBS缓冲液=Tris-HCl+ NaCl+KCl，常用来清洗免疫染色组织或Western blotting中的Western blotting膜;


TBST缓冲液=Tris-HCl+NaCl+tween20，一种常用于Western Blotting的膜缓冲液;


TE缓冲液=Tris-HCl+EDTA，对DNA碱基具有保护作用，常用于DNA的稳定和储存;


TAE缓冲液=Tris碱+乙酸+EDTA，是一种广泛应用于短片段DNA电泳的缓冲体系;


TBE缓冲液=三碱基+硼酸+EDTA，适用于长期DNA电泳，对小片段有较好的分离效果。


Tris缓冲液的优点： ①因为Tris碱的碱性较强，所以可以只用这一种缓冲体系配制pH范围由酸性到碱性的大范围pH值的缓冲液；②对生物化学过程干扰很小，不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀。

Tris缓冲液使用时需注意：①缓冲液的pH值受溶液浓度影响较大，缓冲液稀释十倍，pH值的变化大于0.1；②温度效应大，温度变化对缓冲液pH值的影响很大，所以一定要在使用温度下进行配制，室温下配制的Tris-HCl缓冲液不能用于0℃～4℃。 ③易吸收空气中的CO2，所以配制的缓冲液要盖严密封。④此缓冲液对某些pH电极发生一定的干扰作用，所以要使用与Tris溶液具有兼容性的电极。

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